昆明无血清细胞冻存液推荐厂家
细胞冻存概念:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。细胞冻存和复苏的原则是:慢冻速融,这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂,会导致细胞内冰晶的产生,从而使细胞产生内源性的机械损伤,引起细胞内环境渗透压,PH,电解质等的改变,进而促使细胞死亡。同时另一些保护剂不能穿透细胞。昆明无血清细胞冻存液推荐厂家
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。理论上储存时间是无限的。无血清细胞冻存液厂家供应需液氮冻存,且不能原位(如孔板)冻存。
无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(tumour细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80℃长期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明确,不含动物来源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。细胞冻存是细胞实验中的一个常规技术,通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成,由于血清含有异源成分且生长过程中可能带来的风险Chemicalbook,故传统的细胞冻存配方并不适于体内研究。本产品完全由化学成分组成,无动物来源,目前测试可以很好的冻存T细胞,NK细胞以及MSC等细胞。
冻存细胞复苏方法:1.从冰箱里取出细胞冷冻保存管,立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。2.待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。3.离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗细胞,充分洗净残留冻存液。5.加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后,将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。6.镜检后,研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。无血清细胞冻存液的优势:即用型,无需现配,直接将细胞悬浮于冻存液中即可。
细胞冻存中的注意事项:细胞冻存开始时,要温好相应的培养基和相应的试剂,以及计数耗材,避免操作过程中手忙脚乱。用移液管吹打相应的胞液时,要保证移液管在液面以下吹打,管内要有液体,防止产生相应的气泡,气泡的张力会影响细胞的活率和生存状态。计数细胞时要保证取胞液时也要混匀,这个过程比较重要,细胞不混匀,计数不准,此外吹打应该轻柔,避免细胞在吹打的过程中出现了相应的死亡。冻存离心用50ml离心管比较好,加冻存液吹打混匀比较方便,离心后不能过多地晃动离心管。当离心管液体较多的时候,可以直接倾倒,不要磕,多余的液体较好用泵吸出比较好。冻存支数少的情况,用泵头轻柔吹打,避免出现气泡,冻存支数多用移液管吹打。无血清细胞冻存液产品性能:通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成。珠海正规无血清细胞冻存液厂家推荐
无血清冻存液特性:适合无血清培养细胞与含血清培养细胞。昆明无血清细胞冻存液推荐厂家
细胞冻存液是如何保护细胞的:细胞这一微小的生命体和地球的其它生命相似,机体的主要成份是由液态的H2O组成,但是其结构微小复杂,内部任何的物理损伤对于它都是致命的。水在低于零度的条件下会结冰。如果将细胞悬浮在纯水中,随着温度的降低,细胞内外的水份都会结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡,这种因细胞内部结冰而导致的细胞损伤称为细胞内冰晶的损伤。如果将细胞悬浮在溶液中,随着温度的降低,细胞外部的水分会首先结冰,从而使得未结冰的溶液中电解质浓度升高。如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,在复温时,大量水分会因此进入细胞内,造成细胞死亡。这种因保存溶液中溶质浓度升高而导致的细胞损伤称为溶质损伤或称溶液损伤。昆明无血清细胞冻存液推荐厂家
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